Testování retrovirů

Detekční metody

Principy metody

Regulační zaměření

Kokultivační test

Tato metoda využívá citlivé indikátorové buňky k zachycení infekčních virových částic a určuje stav kontaminace pozorováním jevů, jako jsou cytopatické účinky, fokální tvorba nebo exprese specifického antigenu. Může prokázat přítomnost infekčních retrovirových částic.

• Povinné cíle testování: buňky EOPC nebo produkční -omezené pasážované buňky.

• Postup testování jádra: Musí být použit dvou{0}}fázový ko{1}}kultivační systém (fáze virové amplifikace a fáze indikátoru aktivity).

• Požadavky na citlivé buňky: V závislosti na druhu a původu testovaných buněk musí být pro testy retrovirové infekčnosti použity různé nebo vícenásobné citlivé buněčné linie.

• Požadavky na pasážování kultury: Systém ko{0}}kultury musí být pasážován alespoň 5krát (obvykle více), aby byla zajištěna adekvátní amplifikace potenciálního viru.

Transmisní elektronová mikroskopie

Tato metoda využívá -transmisní elektronovou mikroskopii s vysokým rozlišením k přímému pozorování morfologie a struktury virových částic (jako je typická ikosaedrická obalová struktura a nukleokapsidová morfologie), což umožňuje vizuální identifikaci a kvantitativní analýzu. Dokáže detekovat známé i neznámé virové částice, včetně -nereplikujících se částic nebo těch, které nebyly zachyceny testy infekčnosti.

• Povinné cíle testování: buňky EOPC nebo produkční -omezené pasážované buňky.

• Základní požadavek: Musí být identifikován typ a množství retrovirových částic.

• Požadavky na vzorky: Vyžaduje se ultratenké krájení, typicky vyžaduje systematické pozorování alespoň 200 buněk.

• Zvláštní ustanovení (Chinese Pharmacopoeia 2025): U určitých buněk hlodavců (např. CHO, BHK-21) nebo hmyzích buněk by mělo být také stanoveno množství virových částic ve sběrné tekutině a jejich infekčnost.

Reverzní transkriptázový test

Na základě charakteristiky reverzní transkriptázy katalyzující syntézu DNA z templátu RNA lze nepřímo určit přítomnost retrovirů detekcí radioaktivních nebo fluorescenčních signálů reakčních produktů pro kvantifikaci enzymové aktivity. Tato metoda je nezávislá na virové infekčnosti a může široce skrínovat virové částice s enzymatickou aktivitou.

• Vysvětlení výjimky: ICH Q5A(R2) i Čínský lékopis (vydání 2025) jasně uvádějí, že tento test není vyžadován pro buňky, o kterých je známo, že produkují retroviry (jako jsou některé buňky hlodavců, hmyzu a ptáků).

• Alternativní požadavky: V případech výjimky musí být proveden komplexnější test na typ virových částic, množství a infekčnost.

PCR nebo jiné specifické in vitro metody

Na základě druhové specifičnosti buněk, kdy jsou výsledky aktivity reverzní transkriptázy nejasné nebo je nelze měřit, lze použít druhově -specifické metody detekce retrovirů, jako je retrovirová PCR, imunofluorescence, ELISA atd. Pro kvantifikaci retrovirových částic lze také použít kvantitativní PCR retrovirů.

• Primární polohování: Obvykle se používá jako důležitý doplněk k výše uvedeným základním metodám a nástroj pro potvrzení specifičnosti.

• Aplikační scénáře: Běžně používané pro vysoce citlivou detekci a kvantifikaci specifických známých virů (např. qPCR) nebo pro poskytnutí důkazu na molekulární- úrovni, když jsou výsledky infekčnosti/elektronové mikroskopie sporné.

• Regulační základ: Jeho aplikace vyžaduje důkladnou validaci a musí být v souladu s příslušnými pokyny pro validaci specifických detekčních metod na cílovém trhu (např. Čínský lékopis (vydání 2025)).

Profesionální služby

Komplexní ochrana pro vás

Globální přístup k dodržování předpisů

Naše testovací metody jsou hluboce integrovány se základními požadavky ICH Q5A(R2), Chinese Pharmacopoeia (2025), USP a EP a poskytují-službu na jednom místě zahrnující testování infekčnosti, transmisní elektronovou mikroskopii (TEM) a detekci aktivity reverzní transkriptázy a účinně podporují současnou aplikaci v mnoha oblastech včetně Číny, USA a Evropy.

Široko{0}}spektrální detekční schopnost

Máme řadu citlivých buněčných linií a vyspělých metod pro různé rizikové scénáře, které mohou účinně detekovat cílové patogeny včetně myších retrovirů, retrovirů tropismu a retrovirů hmyzu, což zajišťuje široké spektrum a specifičnost detekce.

Vlastní platforma elektronové mikroskopie

Máme vlastní transmisní elektronový mikroskop s vysokým{0}}rozlišením a špičkový profesionální technický tým, abychom dosáhli kontroly kvality v uzavřeném okruhu- během celého procesu od přípravy vzorku až po výstup dat. Můžeme také poskytnout rychlé kvantitativní služby pro suroviny (UPB), abychom přesně podpořili následné ověření odstranění virů.

Komplexní validace metod

Všechny metody jsou prováděny podle standardů GMP/GLP, přísně dodržují Čínský lékopis (vydání 2025) a ICH Q2(R2) pro komplexní ověření specificity, detekční limity atd. Poskytujeme kompletní-řízení projektu od návrhu protokolu až po aplikační podporu, přičemž zajišťujeme shodu a spolehlivost dat.

Ochrana integrity dat

Od příjmu vzorku a provedení experimentu až po vydání zprávy jsme vytvořili kompletní systém kvality, který je v souladu se zásadami GMP a ALCOA+. Prostřednictvím profesionální více{2}}kontroly dat a robustního mechanismu kontroly odchylek (CAPA) v zásadě zajišťujeme vysokou-kvalitní a auditovatelné dodání pro každý projekt.