Identifikace buněčné linie a buněčné banky
Identifikace buněčné linie a buněčné banky je regulačním požadavkem. Buněčné linie a buněčné banky používané v protilátkových léčivech, proteinových léčivech a produktech buněčné terapie musí zajistit jejich kvalitu, čistotu a bezpečnost. Správná identifikace buněčné linie a buněčné banky je zásadní při výrobě biofarmaceutik.
Způsoby identifikace buněčné linie a buněčné banky
Identifikace buněčné linie a buněčné banky se primárně zaměřuje na hlavní buněčné banky (MCB) a banky pracovních buněk (WCB). Kromě toho výzkumné buněčné banky (RCB) obvykle procházejí mykobakteriálními a sterilními kontrolami, než jsou začleněny do zařízení GMP pro výrobu MCB. Výrobci mohou také požadovat specifické testování virů.
Podle současných předpisů (např. ICH Q5A/Q5B/Q5D) zahrnuje identifikace buněčných linií a buněčných bank především tyto aspekty: identifikace buněk, testování sterility, testování mykoplazmat, testování endogenní a exogenní virové kontaminace a testování tumorogenity. Testovací položky a metody poskytované HyQure Biotech jsou popsány níže::
|
Testovací položky |
Detekční metody |
|
|
Identifikace buněk |
Izozymy, CO1, STR, druhová identifikace |
|
|
Bakteriální a mykotické vyšetření |
Membránová filtrace, přímá inokulace a metoda respiračního signálu |
|
|
Test na mykoplazmu |
Metoda přímé kultivace, metoda indikátorové buněčné kultury, metoda qPCR (pro testování mykoplazmat a spiroplazmat) |
|
|
Test na mykobakterie |
Kultivační metoda, metoda qPCR |
|
|
Testování exogenních a endogenních virových agens |
Pozorování buněčné morfologie a adsorpce krve |
Pozorování morfologie buněčné kultury a test adsorpce krve |
|
In vitro očkování různých indikátorových buněk |
Vyšetření cytopatického účinku |
|
|
In vivo inokulace zvířat a slepičích embryí |
Slepičí embryonovaná vejce, kojené a dospělé myši atd. |
|
|
Retrovirový test |
Test infekčnosti, elektronová mikroskopie, aktivita reverzní transkriptázy (TEM-PERT) |
|
|
Druhově-specifické testování virů |
Odvozeno-od myši, od člověka-odvozeno, od opice-odvozeno |
|
|
Testování na bovinní viry |
Vyšetření cytopatického efektu, metoda qPCR |
|
|
Testování virů prasat |
Vyšetření cytopatického efektu, metoda qPCR |
|
|
Další specifické virové testy |
Test na myší parvovirózu atd. |
|
|
Vyšetření tumorigenicity |
Pokusy na zvířatech |
|